- 阴道闭锁 阴道完全闭锁，多因先天性发育畸形所致，患者的子宫亦常发育不全，故即使采用手术矫正阴道，受孕的机会极少。阴道不完全闭锁往往是由产伤、腐蚀药、手术或感染而形成的瘢痕挛缩狭窄，其中央仅留小孔，闭锁位置低者可影响性生活。在妊娠期，瘢痕可随妊娠的进展而充血软化，如仅有轻度环形或半环形狭窄，临产后先露部对环状瘢痕有持续扩张作用，常能克服此种障碍，完成分娩。若闭锁位置低，可根据情况作单侧或双侧预防性会阴侧切，以防严重的会阴裂伤。瘢痕广、部位高者不宜经阴道分娩，以剖宫产为妥。
- 宫腔粘连 宫腔粘连综合征是指子宫内壁粘连，造成宫腔全部或部分闭塞，导致的一系列症状。宫腔粘连综合征患者一般均有子宫腔操作史，如人工流产术、清宫术、子宫肌瘤剔除术，甚至足月分娩或中期引产后等。更多见于人工流产及反复刮宫术后。由于子宫内膜与肌层的过度创伤，特别是合并感染的情况下，使子宫腔或宫颈管发生粘连。根据粘连的部位、程度及面积的不同，临床表现各种各样，如闭经、月经过少、痛经、反复流产及不孕等。诊断依据为病史、盆腔检查、子宫探针试验、子宫碘油造影及宫腔镜检查等。
- 阴道横隔 阴道横隔系胚胎期由泌尿生殖窦——阴道球向头端增生增长演变而成的阴道板，自下而上腔道化时受阻，未贯通或未完全腔化所致。常发生于阴道上、中1/3交界处，但亦发生于阴道任何部位，直到阴道顶端，接近宫颈。可能因两侧副中肾管尾端与尿生殖窦相接处未被贯通所致。阴道横隔多位于阴道上中1/3交界处，也有发生在其他部位者。完全性横隔少见可致阴道闭锁;通常在隔中央或侧方有小孔，其大小不一，影响阴道液与经血排放。
- 卵巢性闭经 如果卵巢缺如或发育不良、卵巢损坏或早衰，使体内无性激素产生时，子宫内膜即不能生长，也不能发生周期性变化和剥脱，月经不能来潮，这种闭经，称为卵巢性闭经。
- 性腺发育不良 性腺发育不良：也叫特纳氏综合症，xo型，缺少一条X染色体。属于性染色体遗传病。由于性染色体异常，卵巢不能生长和发育，因此卵巢呈条索状纤维组织，无原始卵泡，也没有卵子。故缺乏女性激素.导致第二性征不发育和原发性闭经，是人类惟一能生存的单体综合征。典型的性腺发育不良在出生时即呈现身高、体重落后，手、足背明显浮肿，颈侧皮肤松弛。出生后身高增长缓慢，主要临床特征为：女性表型，后发际低，50%有颈蹼;盾形胸，乳头间距增宽;肘外翻和多痣等。约35%患儿伴有心脏畸形.以主动脉缩窄多见。此外.尚可见肾脏畸形(如马蹄肾、异位肾、肾积水等)，指(趾)甲发育不良，第4、5掌骨较短和多痣等。患儿外生殖器一直保持婴儿型.小阴唇发育不良，子宫不能触及。大部分患儿智能正常。常因生长迟缓、青春期无性征发育、原发性闭经等。任何治疗，都不能促进卵巢发育，都不能使患者恢复生育功能。治疗的目的，在于促进身高，刺激乳房及生殖器官发育。
- 继发性闭经 曾有月经但后来停经的情况则称为继发性闭经。继发性闭经是指月经来潮后出现停经6个月以上者，或在月经稀发的妇女中停经达到3个正常的间隔周期者。
- 宫颈闭锁 先天性宫颈闭锁临床上罕见。若患者子宫内膜有功能时，青春期后可因宫腔积血而出现周期性腹痛，经血还可经输卵管逆流入腹腔，引起盆腔子宫内膜异位症。治疗可手术穿通宫颈，建立人工子宫阴道通道或行子宫切除术。
- 子宫内膜梗阻 正常情况下，子宫内膜覆盖于子宫体腔面，如因某种因素，使子宫内膜在身体其他部位生长，即可成为子宫内膜异位症。这种异位的内膜在组织学上不但有内膜的腺体，且有内膜间质围绕;在功能上随雌激素水平而有明显变化，即随月经周期而变化，但仅有部分受孕激素影响，能产生少量“月经”而引起种种临床现象。患者如受孕，异位内膜可有蜕膜样改变。这种异位内膜虽在其他组织或器官内生长，但有别于恶性肿瘤的浸润。本病发生的高峰在30～40岁。子宫内膜异位的实际发生率远较临床所见为多。如在因妇科其他病行剖腹探查时及对切除的子宫附件标本仔细作病理检查，可发现约20～25%患者有异位的子宫内膜。
- 始基子宫 始基子宫又称痕迹子宫。在胎儿发育时期，女性生殖器官由两侧副中肾管汇合而来，始基子宫系两侧副中肾管汇合后不久即停止发育所致，常合并无阴道。这种子宫极小，仅1～3厘米长，多无宫腔、无子宫内膜，无月经来潮。阴道四维彩超，可以清晰地看到始基子宫的影像，始基子宫很小，似一条索状，无宫腔波。始基子宫由于没有宫腔、没有子宫内膜，不会有月经来潮。
- 单角或双角子宫 单角子宫：一侧副中肾管发育完好，形成一发育较好的单角子宫伴有一发育正常输卵管。对侧副中肾管发育完全停止。单角子宫的功能可能正常。如妊娠，则妊娠及分娩经过可正常，但亦可能引起流产或难产。 双角子宫:是由于副中肾管的尾端已大部融合,纵隔已退化,形成单宫颈、单阴道,子宫底部会合不全,子宫外形呈双角形,故称双角子宫或鞍状子宫。 单角子宫，双角子宫都是子宫畸形。
- 经闭不行 经闭不行： 出《妇人大全良方》卷一。亦名不月、月闭、不月水、月水不来、月经不通、血闭、月事不来、月事不通、月不通、月使不来、月水不通、月经不行、经水不通、经闭不利、经脉不行、经脉不通、经候不行、歇、歇经等。指女子超过十八周岁以上，仍不见月经来潮，或曾来过月经，但又连续闭止三个月以上者，除妊娠、哺乳期等生理性闭经外，均称之为经闭。亦包括女子暗闭经在内。
- 青春前期闭经 青春前期闭经：女孩6～9岁可从尿中查出去氢表雄酮(DHEA)及其硫酸盐，10岁起迅速升高，此乃肾上腺功能初现的表现，来源于肾上腺的雄激素促使阴毛、腋毛出现，身材迅速长高，因为下丘脑-垂体-卵巢轴尚待进一步发育完善，雌激素水平尚低，子宫内膜增殖较差，还不会引起出血，故月经推迟来潮。初潮前这一阶段未见月经来潮属于生理现象，有些女孩在初潮后尚有一年半载的月经数月来潮一次，且为无排卵月经也属正常。
- 垂体性闭经 垂体性闭经：垂体肿瘤所致的闭经可伴有头痛，视物不清，或泌乳;垂体前时坏死之闭经，发生于产后大出血，表现为性欲减退，生殖器萎缩，乏力怕冷，毛发脱落。
- 腹痛 腹痛为临床常见症状之一，可表现为急性或慢性，其病因复杂，多数为器质性，也可为功能性；多为腹腔内器官病变起，也可为腹腔外器官病变所致，因此在诊断时要全面考虑，详细分析病史及各项检查结果。
- 性交困难 性交困难是指夫妻在性生活中因某些原因招致生殖器难于互相交接。性交难以完成，心理障碍为主要因素，还可因先天缺陷或器质性疾病、或有性交技术的原因各种因素常互为因果，终致性交困难。
- 女性不孕 不孕，指育龄妇女婚后未避孕而未能受孕。传统把婚后3年以上未受孕者诊断为不孕症。20世纪70年代后，国际妇产科联合会将不孕症的定义缩短为1年。据调查，婚后1年的受孕率最高，可达 95％，美国不孕学会建议，婚后夫妇同居1年，规律性生活，未采取避孕措施而未怀孕者，可诊断原发性不孕症。有1次以上撤或流产，又经1年未再受孕者诊断为继发性不孕。
- 下腹疼痛 下腹疼痛，指的是因盆腔器质性或功能性病变引起的下腹疼痛。是妇科不孕不育病人常见的主诉症状之一。下腹疼痛其痛觉都沿交感神经和副交感神经的感觉神经传导。各生殖器对疼痛的敏感程度不同。会阴、外阴、阴道下段对疼痛十分敏感，而阴道上段则相对的不敏感。子宫颈也相对的不敏感，而扩张宫颈可致盆腔深处强烈的痛。子宫体比峡部不敏感，当子宫内容物压迫宫颈内口的神经末梢时，子宫收缩时特别痛。卵巢对很多刺激不敏感p但对双合诊检查时的挤压动作很敏感，卵巢实质较快地膨胀时，会引起疼痛。输卵管对切、碾、压和碰触动作，均很敏感。
- 下腹坠胀 医学症状之一，下腹即小肚子，肚脐以下的部份，坠即下坠，胀即胀满。总的意思是说，小肚子向下坠着膨胀。日常生活中，女性总会遇到很多不可言喻的不适，下腹坠胀就是较常见的一种。下腹坠胀主要与盆腔充血密切相关，不少都可以归属为医学上所称的盆腔淤血综合征。
- 生理性闭经 生理性闭经属于正常现象。正常月经周期的维持，需依赖下丘脑——垂体——卵巢功能的协调和子宫内膜对性激素的周期性反应。上述环节中任何一处发生问题，即可能引起闭经。闭经患者绝大多数无排卵，因而不能受孕。除生理性闭经(见于青春期前女孩、绝经期后妇女和孕妇)外，其他的闭经皆属病理性的。
- 子宫性闭经 子宫内膜受卵巢分泌的性激素的刺激而有周期性改变，当子宫内膜剥离脱落时即有月经来潮，因此，在先天性无子宫或子宫发育不良，子宫内膜损坏或子宫切除的病例，即使卵巢功能健全，性激素分泌正常，也无月经来潮，这种闭经的原因在子宫，故又称子宫性闭经。
闭经早期症状有哪些？
【临床表现】
1.生理性闭经的临床表现
(1)青春前期闭经：女孩6～9岁可从尿中查出去氢表雄酮(DHEA)及其硫酸盐，10岁起迅速升高，此乃肾上腺功能初现的表现，来源于肾上腺的雄激素促使、腋毛出现，身材迅速长高，因为下丘脑-垂体-卵巢轴尚待进一步发育完善，雌激素水平尚低，子宫内膜增殖较差，还不会引起出血，故月经推迟来潮。初潮前这一阶段未见月经来潮属于生理现象，有些女孩在初潮后尚有一年半载的月经数月来潮一次，且为无排卵月经也属正常。
(2)哺乳期闭经：母乳喂养的妇女在任何时候断奶，则常在断奶后2个月恢复月经。
(3)绝经过渡期及绝经后闭经：绝经过渡期可能数月出现一次子宫出血，绝经后生殖器官逐渐萎缩，子宫也缩小。
2.病理性闭经的临床表现
(1)子宫性闭经及隐经：
①无孔：临床症状逐渐出现，最初可感周期性下腹坠胀、疼痛，进行性加重，血肿压迫尿道及直肠，可引起排尿及排便困难、耻骨上痉挛性疼痛、坠胀、尿频、尿急、尿痛，甚至点滴状排尿。当宫腔大量积血时，可导致输尿管移位、扭曲、积水，甚至肾盂积水。经血逆流入盆腔时，可刺激腹膜产生剧烈腹痛。腹部检查时可扪及一触痛明显的包块，有深压痛，少数患者可有轻度肌紧张，反跳痛。妇科检查时发现，变薄膨出，无开口，表面呈紫蓝色。肛诊可触及阴道血肿，子宫增大、触痛，双附件为腊肠样条状包块、触痛。病程长者可有不规则增厚，数目不等的触痛结节。B型超声或CT检查可探及阴道桶状囊实性肿块，宫腔及输卵管内积液。
②先天性无阴道：本症常因青春期不来月经，或出现周期性下腹疼痛，或婚后困难，或不孕，就诊时检查发现。、第二性征及外生殖器发育正常，卵巢功能正常;基础体温(BBT)呈双相型，血生殖激素测定呈育龄妇女周期性变化。若伴有子宫缺如或始基子宫，可无症状;若有子宫有功能的内膜存在，则可能因宫腔积血有进行性加重的周期性下腹疼痛。妇科检查时可发现外阴无阴道口，若婚后较长时间才就诊者，可发现前庭区有一因而形成的浅窝。大多数患者盆腔内可触及一条索状痕迹子宫。若患者存在有功能的子宫内膜，年龄较小而就诊者检查时可发现一小子宫，或可触及正常或增大的痛性子宫，有时可触及腊肠样增粗的输卵管。B超、CT等影像学检查可以证实上述发现，并可发现泌尿系统畸形。
③阴道横隔：不完全横隔者，因经血可经小孔流出，故无闭经。完全性横隔者因经血排出障碍，出现原发性闭经、周期性下腹疼痛等表现。
完全性阴道中、上段横隔者妇科检查时可发现有一定长度、宽度的阴道下段，顶端封闭、触及一有波动感的隔膜，其上方阴道扩张，似有囊性感。阴道下段横隔有时不易与阴道闭锁区别，仔细的妇科检查结合隔后腔穿刺是有效的鉴别方法。
④阴道闭锁：临床表现为原发性闭经、周期性下腹疼痛等。妇科检查见外阴发育不良，无孔，但表面色泽正常，无向外膨隆征，肛诊时可发现在距外阴3cm左右的上方有一突向直肠的阴道囊性包块，腹痛时包块张力大。经腹或经直肠B超探查可在距3～4cm上方探及一囊性桶状包块，在B超引导下经外阴向肿块穿刺，可抽出陈旧暗红色血液或巧克力样糊状物。Ⅱ型者阴道完全闭锁，临床表现也为原发性闭经、周期性下腹疼痛等。妇科检查在盆腔一侧或较高处有直径4～8cm的包块，为畸形的子宫或附件肿物。
⑤宫颈闭锁：若患者无子宫内膜，仅表现为原发性闭经，若有子宫内膜，其临床表现与先天性无阴道相似。
⑥先天性无子宫：临床表现为原发性闭经，肛腹诊扪不到子宫，B超、CT及MRI亦不能探及子宫的存在。
⑦始基子宫：患者表现为原发性闭经，肛诊及B超等影像学检查可发现一小子宫，仅2～3cm长，腹腔镜检或剖腹手术时可见一扁平实心，0.5～1cm厚的子宫痕迹。
⑧米勒管发育不全综合征：表现为原发性闭经，生殖道的缺陷包括先天性无阴道，子宫可正常，也可为各种发育畸形，包括双角子宫、单角子宫、始基子宫、残角子宫、双子宫等，罕为先天性无子宫。该征患者卵巢发育及功能均正常，因此第二性征发育正常。约34%的患者合并泌尿道畸形，12%有骨骼畸形，7%有腹股沟疝，4%存在先天性心脏病。若为双子宫、双角或单角子宫、残角子宫，则不引起闭经。
⑨创伤性宫腔粘连：临床表现与粘连部位和程度有一定关系，但二者间不完全一致。月经量少、经期缩短、闭经、不孕、流产及产科并发症是主要临床症状。在宫腔手术后月经量减少或闭经，尤其是在产后1周子宫内膜再生时刮宫或人工流产手术后易于损伤内膜或葡萄胎患者连续多次清宫术后。部分患者有周期性腹痛，双合诊可扪得子宫稍大或正常大，有轻压痛及双附件区压痛。宫颈内口粘连的患者多为人工流产术后即闭经，部分患者因宫腔积血和经血逆流入腹腔可表现为腹痛，宫颈举痛，宫体增大压痛，阴道后穹隆穿刺抽出暗红色不凝血液，表现类似异位妊娠。宫腔探针检查可发现宫颈内口阻塞或狭窄，探针沿子宫屈曲方向及子宫腔轴向前进时，粘连轻者可在受阻后有突破感之后进入宫腔，同时可能有少量暗红色很稠的血液流出。如为宫腔粘连，探针进入宫腔后感到活动受限。宫颈内口严重粘连者则探针不能进入内口，需在持续骶神经阻滞麻醉下进行探宫颈口，这种严重的宫颈内口粘连也可发生在非妊娠子宫患者作子宫颈激光或电烙时，手术伤及宫颈管内膜及内口。
(2)卵巢性闭经：
①Turners综合征：A.16岁后仍无月经来潮;B.身材矮小、第二性征发育不良、蹼状颈、盾胸、肘外翻;C.高促性腺激素，低性腺激素;D.染色体核型为45，XO;46，XX/45，XO;45，XO/47，XXX。
②先天性性腺发育不良：染色体核型和身高正常，第二性征发育大致正常。余同Turner’s综合征。
③卵巢早衰：A.40岁前绝经;B.高促性腺激素和低性腺激素;C.约20%左右有染色体核型异常;D.约20%伴有其他自身免疫性疾病;E.病理检查提示卵巢中无卵泡或仅有极少原始卵泡;F.腹腔镜检查见卵巢萎缩;G.有医源性损坏卵巢的病史;H.对内源性和外源性促性腺激素刺激无反应;I.氯米酚试验，于周期第5天起，口服氯米酚50～100mg，1次/d，共5天。于周期第3天和10天分别测血清FSH，如第10天FSH值>20U/L，提示卵巢功能低下。
④抵抗综合征：A.原发或继发性闭经;B.高促性腺激素和低性腺激素;C.病理检查提示卵巢中有多量始基卵泡和未成熟卵泡;D.腹腔镜检查见卵巢大小正常，但无生长卵泡和排卵痕迹;E.对内源性和外源性促性腺激素刺激无反应。
⑤多囊卵巢综合征：临床表现可见有月经稀发、闭经、不孕的慢性无排卵现象;有多毛、痤疮和黑棘皮病等高雄激素血征现象;肥胖。
(3)垂体性闭经：
①垂体肿瘤和高泌乳素血症：临床表现可见闭经或月经不调;泌乳;如垂体肿瘤较大可引起头痛和视力障碍;如为空蝶鞍综合征可有搏动性头痛;排除服药引起的高泌乳素血症。
②垂体功能衰竭：临床表现可见有产后大出血或垂体手术的病史;消瘦、乏力、畏寒、苍白，产后无乳汁分泌，无，无卵泡发育，生殖道萎缩;检查有性激素水平低下及甲状腺功能低下和肾上腺功能低下的症状、体征。
(4)中枢和下丘脑性闭经：
①单一促性腺激素释放激素低下：A.原发性闭经，卵泡存在但不发育;B.有的患者有不同程度的第二性征发育障碍;C.Kallmann’s患者伴嗅觉丧失;D.FSH、LH、E2均低下;⑤对GnRH治疗有反应;⑥X染色体(Xp22.3)的KAL基因缺陷。
②功能性下丘脑性闭经：A.闭经或不规则月经;B.常见于青春期或年轻女性，多有节食、精神紧张、剧烈运动及不规律生活史;C.体型多瘦弱;D.TSH水平正常，T3和T4较低;E.FSH和LH偏低或接近正常，E2水平偏低;F.超声检查提示卵巢正常大小，多个小卵泡散在分布，髓质反光不增强。
【诊断】
一、病史 对原发性闭经患者应询问生长发育过程，幼年时曾否患过病毒性感染或结核性腹膜炎，家族中有无同类疾病患者。对继发性闭经患者应了解初潮年龄、闭经期限，闭经前月经情况，以及有无精神刺激或生活环境改变等诱因;是否服过避孕药，曾否接受过激素治疗及对治疗的反应;有无周期性下腹胀痛;过去健康情况如何，有无结核病或甲状腺病;有无头痛、视力障碍，或自觉溢乳等症状。如有妊娠史者，需询问流产、刮宫、产后出血及哺乳史等。
二、体检
1、全身检查 注意发育、营养、胖瘦及智力情况;测体重及身高;检查第二性征发育程度、毛发多少及分怖;轻挤，观察有无泌乳。
2、妇科检查 注意有无腹部及腹股沟包块;外生殖器发育情况及有无畸形;子宫及卵巢是否增大，子宫附件处有无包块或结节等。
通过详询病史和体检，可除外妊娠，和无孔或阴道闭锁所引起的假性闭经。
三、诊断步骤
正常的月经周期是下丘脑垂体卵巢轴正常功能的具体表现，对闭经的患者，采用下列诊断步骤，有助于了解病变的所在部位，进而根据患病部位寻找病因。
(一)第一步 估计内源性雌激素水平，以了解卵巢功能。对每一个闭经患者，首先应了解体内雌激素水平，可用下列几种试验作出估计。进行试验前至少在6周内未用过激素药物。
1、孕酮撤血试验 此试验是估计内源性雌激素水平较简单又快速的方法。具体方法是：采用孕酮油剂20mg肌注，每日一次，连续5天;或口服醋甲孕酮，每日10mg，连服5天。停药后2～7天，出现撤药性出血者为阳性，表示患者有功能性子宫内膜，且已受足够的雌激素影响，外源性孕酮使其产生分泌期变化，停药后内膜剥脱而导致出血。这种闭经称为I度闭经，估计闭经的病变部位在下丘脑垂体，从而引起排卵障碍，常见于青春期下丘脑-垂体-卵巢轴不成熟、多囊卵巢综合征以及高催乳素血症患者。撤药性出血量的多少与雌激素的水平高低有关，如仅有少量滴血，提示雌激素在临界水平，应引起重视。
2、阴道脱落上皮细胞检查和宫颈粘液检查 阴道上皮和宫颈粘液都受卵巢激素影响而发生周期性变化。阴道脱落上皮细胞的核固缩及嗜伊红反应可反映体内雌激素水平。雌激素使宫颈粘液变稀薄、拉丝长、并出现羊齿状结晶。每周化验2～3次，连续一个月，可以了解雌激素水平高低，有无周期性变化。
根据报道，约有33%的继发性闭经是由于高催乳素血症引起，所以在第一步检查中应包括血催乳素的测定。当血催乳素大于25μg/L(ng/ml)时，应即进行蝶鞍多向断层摄片以排除垂体肿瘤。由于受条件限制，目前尚未能将血催乳素测定列为常规检查项目。
(二)第二步 雌激素撤血试验 如果孕酮未能引起撤药性出血，可能是由于内源性雌激素不足，子宫内膜未受到足够雌激素的影响以致没有正常的增生期变化之故，在此种情况下虽给孕酮，并不能使子宫内膜呈分泌期变化而脱落;也可能是子宫内膜有缺陷，对雌激素不起反应。雌激素试验的目的是给予患者足够量的雌激素及孕激素，以观察停药后的出血情况。具体方法是：口服乙烯雌酚，每日1mg， 连服20天;或炔雌醇，每日0.05mg， 连服20天。在服药的第16天开始，每日加孕酮20mg肌注，或口服甲孕酮每日10mg，连服5天。停药后2～7天有出血者为阳性反应，表示患者具有正常功能的子宫内膜，对外源性雌、孕激素能作出反应，证明闭经是由于体内缺乏雌激素之故，称为Ⅱ度闭经。如果停药后没有撤药性出血，可重复一次雌激素试验，目的是促使子宫内膜产生雌激素受体。如仍无出血，提示子宫内膜有缺陷或已遭到破坏，称为子宫性闭经。
(三)第三步 促性腺激素测定 对雌激素撤血试验阳性的患者，应寻找缺乏雌激素的原因，区别雌激素缺乏是由于卵巢已丧失分泌雌激素的能力，还是由于体内缺乏促性腺激素而卵巢不分泌甾体激素。故需测定促性腺激素。具体方法有两种：
1、放射免疫法测定促卵泡激素(FSH)和黄体生成激素(LH)正常血清FSH值为5～40IU/L(mIU/ml);正常血清LH值为5～25IU/L，在月经周期中，排卵高峰值约为基值的3倍。经2～3次测定后可将结果分为增高、正常和降低三组。临床上，FSH增高的意义较大，如FSH高于40IU/L，提示卵巢功能已衰竭。如LH低于5IU/L表示促性腺激素功能不足。若FSH和LH都降低，常提示垂体或更高中枢功能低落。
2、生物鉴定法 过去常用的是测定24h尿中促性腺激素(FSH和LH)含量，但由于主要是24h尿中FSH的排泄量有临床意义，故习称FSH测定。24h尿液FSH的排泄量，经不同时间的2～3次测定均>52.8小白鼠子宫单位时，提示垂体功能亢进，闭经的原因在卵巢;如果24h尿FSH的排泄量<6.6小白鼠子宫单位，提示垂体功能减退，闭经的原因在垂体或垂体以上的部位。但是，由于动物反应性的差异，以及尿的收集、提取、浓缩等步骤的误差，常影响本法的精确度，目前有条件的单位，均采用放射免疫法测定促性腺激素。
(四)第四步 垂体兴奋试验 当FSH与LH均低落时，可进行垂体兴奋试验以了解病变在垂体，还是在下丘脑。
垂体兴奋试验一般在上午进行，具体方法是：将100μgLHRH溶于5ml生理盐水中，静脉注射，于30秒钟内注完。于注射前和注射后15、30、60、120分钟各采血2ml，分离血清后，低温保存，用放射免疫法测定LH的含量。如果在注射后15～45分钟释出的LH值较注射前增高3倍以上，说明垂体对外源性LHRH反应良好，其功能正常，闭经的病 原在下丘脑或以上部位。如果注射后LH值无增高或增高不多，则病原可能在垂体。
上述的垂体试验方法称为典型的垂体兴奋试验，曾被广泛应用，但它有局限性。有时垂体有病灶，但未被完全破坏，仍可释放较多的LH;相反，正常的垂体在较长时间失去内源性促性腺激素释放激素的刺激，可以出现惰性，对一次注射LHRH可不出现反应或反应延迟，必须连续数次注射，才能逐渐恢复正常反应。因此，对垂体兴奋试验阴性的病例，多次重复试验才有临床意义。Combes介绍静脉滴注LHRH试验，方法是用100μgLHRH静脉滴注4小时。在正常情况下，当滴注后30～45分钟时LH上升，60～90分钟时下降，2～4分钟内第二次上升，可维持4小时。这种双相型分泌是根据人垂体中有两个LH池的理论，第一池在LHRH刺激下立即释放LH，而第二池需在大量或较长期的LHRH刺激下才释放贮存的与新合成的LH。静脉滴注法可区分下丘脑或垂体性病变，如果病因在下丘脑而引起垂体惰性，则单次LHRH试验可能阴性，而静脉滴注法可在2小时左右后出现延迟反应;如果垂体功能有缺陷，LH虽可有第一次上升，但不能维持， 而且继续静脉滴注，不再出现第二次上升，提示垂体合成LH的功能受到限制。
四、辅助诊断 上述诊断步骤适用于初来就诊，一时尚缺乏闭经病因线索的患者。临床上，有时通过病史和体检，即可发现闭经的病原线索，这时可根据病情需要，直接采用特种辅助诊断措施以明确诊断。常用的辅助诊断法如下：
(一)诊断性刮宫 此法适用于已婚妇女。对疑有生殖道结核，或闭经发生在人工流产后的患者，经刮宫可以了解子宫腔的大小，宫颈或宫腔有无粘连。刮出的子宫内膜作病理切片检查，可间接了解性激素的分泌情况，以及诊断子宫内膜结核。
(二)子宫输卵管碘油造影 有助于诊断生殖系统发育不良、宫腔粘连及生殖道结核等。
(三)外周血染色体检查 对原发性闭经，应常规行外周血染色体检查，特别是身材矮小、发育迟缓、不发育或外生殖器畸形者，更应检查染色体组型，以明确闭经的原因。
(四)蝶鞍多向断层摄片 主诉闭经合并泌乳的患者，应进行蝶鞍多向断层摄片。蝶鞍多向断层摄片可发现3～10mm大小的微型腺瘤，表现为蝶鞍前壁下方的一侧凸出与蝶鞍底板前方或后方侵蚀。
(五)腹腔镜检查 可直接观察子宫、输卵管和卵巢的形态，并可作卵巢活组织检查，对诊断卵巢早衰或多囊卵巢综合征有帮助。
(六)甾体激素放射免疫法测定 在闭经诊断的第一步骤中，要求对体内雌激素水平作出初步估计。用放射免疫法测定血中甾体激素可提供闭经病因的诊断，例如血E2很低，合并FSH异常增高时，提示卵巢功能衰竭;血睾酮增高常提示有多囊卵巢征群，或有分泌雄激素肿瘤存在的可能;含Y染色体的闭经患者，也可能有血睾酮增高现象。
(七)甲状腺功能测定 考虑闭经与甲状腺功能异常有关时，应进行吸碘试验及T3、T4测定。有的高催乳素血症患者可能是由于原发性甲状腺功能减退所引起。
(八)肾上腺功能测定 怀疑闭经与肾上腺功能异常有关时，可进行尿17-酮和17-羟测定。